標題： AF 700 CTB，Alexa Fluor 700 CTB，AF 700 Cholera Toxin Subunit B，Alexa Fluor 700 Cholera Toxin Subunit B
一、化學試劑的基本信息
保存條件：避光、-20°C儲存，避免反復凍融
英文名稱：AF 700 CTB，Alexa Fluor 700 CTB，AF 700 Cholera Toxin Subunit B，Alexa Fluor 700 Cholera Toxin Subunit B
中文名稱：AF700 標記的霍亂毒素B亞基
溶解性：可溶于水，也能溶解于部分有機溶劑，如二甲基亞砜
規格：10mg、25mg、50mg
純度：95%+
品牌信息：陜西新研博美
展開剩余84%二、基本定義
Alexa Fluor 700 CTB（AF700 CTB）是一種將紅色近紅外熒光染料 Alexa Fluor 700（AF700） 與霍亂毒素B亞基（CTB）共價偶聯形成的復合物。
CTB 作為神經示蹤和細胞膜標記的經典工具，能夠特異性結合細胞膜表面的 GM1神經節苷脂，而 AF700 提供高亮度、低背景干擾的近紅外熒光信號（激發波長 696 nm，發射波長 719 nm）。
該探針兼具 靶向特異性 與 成像清晰度，廣泛應用于神經科學、細胞生物學及活體深層組織成像等領域。
化學結構特點
CTB 核心結構：
五聚體蛋白：由 5 個相同亞基（分子量約 11.4 kDa）組成，總分子量約 57 kDa。每個亞基含一個 GM1 結合位點，結合親和力高達 101? M?1。
無毒性：CTB 是霍亂毒素的非毒性部分，不會引發細胞毒性信號。
AF700 染料：
近紅外熒光特性：激發波長 696 nm，發射波長 719 nm，處于生物組織光學窗口（650-900 nm），組織穿透性強，背景熒光低。
化學修飾優化：通過磺化基團提升水溶性，可直接溶于 PBS 等生物緩沖體系；光穩定性強，抗淬滅能力優于傳統染料（如 Cy5.5、Cy7）。
共價偶聯：采用 NHS 酯法 將 AF700 標記于 CTB 的賴氨酸殘基上，形成穩定酰胺鍵，標記率 2-5 個染料分子/CTB 五聚體，保留 CTB 的天然構象和功能。
整體特性：
水溶性好：適配細胞培養、組織切片等多種實驗體系。
pH 耐受性寬：在 pH 4.0-10.0 范圍內穩定。
儲存穩定性佳：-20℃ 避光凍存可長期維持活性，反復凍融 5 次內無明顯活性下降。
使用風險與防范措施
潛在風險：
非特異性結合：過高濃度或長時間孵育可能導致 CTB 非特異性吸附至細胞膜其他區域，開云app下載增加背景信號。
光毒性：長時間激光激發可能損傷細胞（如活性氧生成），影響實驗結果。
儲存與操作風險：反復凍融或不當儲存（如未避光）可能導致探針活性下降或熒光淬滅。
{jz:field.toptypename/}防范措施：
優化實驗條件：
濃度控制：根據預實驗確定最佳標記濃度（通常 1-10 μg/mL），避免過度標記。
孵育時間：活細胞孵育 20-30 分鐘（37℃），固定細胞可延長至 1 小時。
溫和固定：使用 4% 多聚甲醛固定細胞，避免甲醇等有機溶劑破壞膜結構。
減少光毒性：
使用低功率激光或縮短曝光時間，避免長時間連續照射。
添加抗氧化劑（如維生素 C）至緩沖液中，減少光誘導損傷。
嚴格儲存管理：
短期保存：4℃ 避光可存放 1-2 個月（需分裝，避免反復解凍）。
長期保存：-20℃ 避光凍存，復溶后用無疊氮鈉的 PBS 稀釋，工作液現配現用。
質量控制：
使用前通過 SDS-PAGE 或 HPLC 驗證探針純度（≥95%）。
通過流式細胞術或熒光顯微鏡確認標記效率（如 GM1 陽性細胞熒光強度顯著高于陰性對照）。
三、應用優勢與特點
神經科學研究：
神經示蹤：CTB 被神經元攝取后通過逆向運輸至胞體，AF700 的近紅外熒光可穿透較厚組織（如頭皮、顱骨），實現 無創全腦成像，追蹤神經纖維投射與分布。
長期動態觀察：AF700 光穩定性強，適合長時間活體成像（如神經發育、再生研究）。
細胞膜與脂筏研究：
脂筏標記：GM1 是脂筏的標志性成分，AF700 CTB 可標記脂筏分布，研究其在 信號轉導、膜運輸 等過程中的動態變化。
低光毒性：近紅外熒光減少光損傷，適合活細胞長時間觀察（如細胞膜流動性分析）。
活體深層組織成像：
全身 GM1 分布分析：通過尾靜脈注射 AF700 CTB，可快速結合全身各組織細胞表面的 GM1，實現 肝臟、腸道、腫瘤 等深層器官的活體熒光成像。
腫瘤研究：腫瘤細胞表面 GM1 異常表達，AF700 CTB 可用于 腫瘤定位與動態監測（如生長、轉移）。
多重標記與多色成像：
光譜兼容性：AF700 波段與常見熒光染料（如 FITC、TRITC、Cy5）光譜區分良好，適合 多色成像實驗（如同時標記不同細胞群或細胞器）。
高信噪比：近紅外信號降低背景干擾，提升檢測靈敏度。
分子示蹤與檢測：
高靈敏度檢測：在微流控系統中，AF700 CTB 可作為目標分子，與抗體修飾的磁珠聯用，開發 高特異性檢測方法（如 GM1 定量分析）。
四、新研博美目錄列表：
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Gly-Gly-Gly-PEG2-azide，Gly-Gly-Gly-PEG2-N3
azide-PEG-hydrazide，N3-PEG-hydrazide，MW：1000
溫馨提示：
試劑僅用于科研實驗，不可用于人體~~~~~編輯作者：陜西新研博美木南
發布于：陜西省
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